抗肿瘤药物洛铂的临床前药效学研究

洛铂是由德国开发的第3代铂类衍生物，化学名称为1,2-二氨甲基-环丁烷-乳酸合铂，大量的临床前药效研究显示，它能够阻断细胞周期的运行，诱导细胞凋亡，从而有效抑制肿瘤细胞的增殖。目前洛铂已经上市，主要是用于转移性乳腺癌、小细胞肺癌和慢性粒细胞性白血病的治疗。洛铂最常见的不良反应是骨髓抑制，其发生率及严重程度与卡铂相近，其他不良反应包括食欲不振、恶心呕吐及乏力、脱发和腹泻等。对于洛铂的应用需要开展系统的临床前药效学研究，来证实洛铂治疗肿瘤的安全和有效性。

1、洛铂对卵巢癌的作用研究

洛铂引入中国后，研究者开展了一些临床前药效学研究。临床前药效学研究是在新药做临床试验以前要做的药效学研究工作，临床前药效研究目的为临床筛选疗效高、毒性小的药物，避免毒副作用，达到安全、合理用药的目的。美迪西生物医药是一家从事临床前研究外包服务（CRO）的公司，在上海建立了一家拥有集化合物合成、化合物活性筛选、结构生物学、药效学评价、药代学评价和毒理学评价为一体的符合国际标准的综合技术服务平台。

有研究者采用不同浓度的洛铂(Lobaplatin)对人卵巢癌顺铂耐药株SKOV3/DDP细胞分别作用24h、48h和72h，初步探讨其对卵巢癌耐药细胞生长抑制、凋亡诱导及周期阻滞的作用，为明确洛铂能否用于顺铂耐药卵巢癌患者的治疗提供实验依据[1]。方法是：细胞培养至对数生长期，MTT(四苯基氮唑蓝)法测定不同浓度洛铂在不同时间对SKOV3/DDP的抑制率；同时与相同浓度相同时间的顺铂A值进行比较。然后通过光镜及透射电镜观察用药前后SKOV3/DDP细胞的形态学改变；同时在光镜下观察相同浓度洛铂、顺铂作用后的变化；采用流式细胞仪检测洛铂对SKOV3/DDP细胞周期及凋亡率的影响。

结果发现洛铂作用SKOV3/DDP细胞的增殖呈时间剂量依赖模式受到抑制，相同浓度相同时间洛铂、顺铂作用后的A值比较差异有统计学意义(P<0.05)。一定浓度的SKOV3/DDP作用一定时间，可诱导SKOV3/DDP细胞发生凋亡，光镜和电镜下可见典型的凋亡细胞形态学改变，同时光镜下观察到相同浓度下，洛铂作用后的细胞数量明显减少。流式细胞技术分析发现洛铂作用首先引起细胞周期分布的改变，随着用药时间的延长，凋亡率逐渐升高。因此洛铂诱导凋亡是抑制体外培养的SKOV3/DDP细胞生长的机制之一，凋亡的诱导可能与细胞G<,0>/G<,1>期阻滞有关。

2、洛铂对非小细胞肺癌的作用研究

研究者主要评价洛铂单用或与多西他赛、紫杉醇、长春瑞滨合用对非小细胞肺癌的体内、外抗肿瘤作用,以评估洛铂治疗非小细胞肺癌,进入临床试验的可行性[2]。方法是采用磺酰罗丹明B染色法检测了洛铂单用或与多西他赛、紫杉醇、长春瑞滨合用对多种体外培养的人非小细胞肺癌细胞的细胞毒性作用，并与卡铂、顺铂的作用进行比较；以人非小细胞肺癌A549和Calu-3移植瘤为模型，研究其体内抗肿瘤作用。

研究结果表明，洛铂对非小细胞肺癌有明显的疗效，其疗效略弱于顺铂，强于卡铂，但是其毒性小于顺铂而大于卡铂。洛铂与多西他赛、紫杉醇、长春瑞滨合用时对非小细胞肺癌有协同的抗肿瘤作用，尤其是与紫杉醇合用的协同作用最为明显。在不同的非小细胞肺癌模型上，洛铂与多西他赛、紫杉醇、长春瑞滨合用产生协同作用的概率比顺铂和卡铂大。

3、洛铂对转移性乳腺癌的作用

研究发现对于蒽环类、紫衫类药物治疗失败的转移性乳腺癌患者，采用以铂类为主的方案可以获得一些效果。临床前药效学研究表明，洛铂对包括三阴性乳腺癌在内的乳腺癌具有明显细胞毒性，且与伊班膦酸钠（一种钙及骨代谢调节剂，为双膦酸盐类骨吸收抑制剂，其主要用于治疗为伴有或不伴有骨转移的恶性肿瘤引起的高钙血症）具有协同增效作用。洛铂可以通过阻滞肿瘤细胞周期，诱导抑癌基因高表达，致癌基因低表达等发挥抗乳腺癌作用[3]。

此外洛铂对胃肠道恶性肿瘤中胃癌和结直肠癌及其转移的治疗及应用也有大量的临床前药效学和临床及非临床研究。有研究者通过体外实验研究对结直肠癌细胞株LOVO的抑制作用，采用MTT比色法检测不同浓度的洛铂（500、1000、2000μmol）对结直肠癌细胞株LOVO的抑制作用。结果表明洛铂可以抑制LOVO细胞增殖，并且抑制作用具有浓度依赖性。另外在肝细胞癌、骨肉瘤、胰腺癌等多种实体肿瘤的研究中也得到了相似的结果。

由于目前洛铂尚缺乏更高级别，更加充分的循环医学证据，导致其产品的优势及社会和经济效益均未得到应用的体现。因此需要积极开展洛铂在肿瘤治疗中的安全性和有效评价，发现新的和不可预知的不良反应、疗效特点以及适宜人群，为洛铂的临床合理用药提供科学依据。

[1] 洛铂体外诱导顺铂耐药卵巢癌SKOV3/DDP细胞凋亡的实验研究[J].

[2] 洛铂对非小细胞肺癌作用的临床前药效学研究[J].

[3] 抗肿瘤新药洛铂治疗转移性乳腺癌的研究进展[J].