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    [药理知识] SCID小鼠之SCID-hu小鼠在HBV感染上的研究

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  • TA的每日心情

    2018-7-26 15:32
  • medicilon 发表于 2018-8-7 16:09:23 | 显示全部楼层 |阅读模式
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    乙型肝炎病毒感染是一个非常严重的全球性问题,至今仍然缺乏有效的控制手段,在HBV治疗及疫苗研究方面要取得重大突破,其关键是动物模型。因此建立有效的HBV易感染实验动物模型对研制有效的抗病毒药物及疫苗至关重要,SCID小鼠作为一种先天性T、B细胞双重缺陷动物,可以解决乙型肝炎病毒不易在其他动物模型中重现感染过程的问题。
    美迪西经多年药理学服务经验累积,已建立了完善的肿瘤动物模型库,可以根据客户需求提供各种有效的肿瘤动物模型,用来检测药物的有效性。美迪西提供的实验动物可以根据各类肿瘤模型自身的特点,选用免疫缺陷型小鼠,如裸鼠,SCID小鼠,NOD SCID小鼠或免疫健全的Balb/c小鼠,C57BL/6小鼠等。
    SCID-hu是将人类有关免疫细胞、免疫组织和器官移植植入SCID小鼠体内进行人免疫功能重建的模型,是被用做人疾病治疗的临床前实验系统。随着SCID-hu模型的出现,人们可以通过移植人肝细胞、人外周血淋巴细胞等各种方法建立人鼠嵌合模型,让其感染乙型肝炎病毒,来研究乙型肝炎的发病机制,该嵌合模型模拟了疾病在人体内的过程。
    HBV感染SCID-hu人鼠嵌合模型的研究
            为了研究在适应性免疫应答中CD4+T淋巴细胞在体内对HBV的作用,首先收集急性感染HBV并恢复患者的外周血淋巴细胞(PBL),培养、分离并用HBcAg刺激使其分化为HBcAg-特异性CD4+T细胞,检测体外活化后HBcAg-特异性CD4+T细胞的表型及其分泌的细胞因子(IFN-γ, TNF-α等), 证实为Th1类细胞。
    其次,将HBcAg、HBcAg-特异性CD4+ Th1细胞与HBV感染者的PBL, 一起注入NOD/SCID小鼠模型脾内,在第7天和14天时取血分析,HBcAg特异性IgM和anti-HBc-IgG含量。在检测结果中,一组注射了HBcAg, HBcAg特异性CD4+ Th1细胞、HLA DR-13阳性CHB患者PBL的小鼠,明显观测到HBcAg特异性IgM和anti-HBc-IgG产生的抑制;而其他分组没有这个现象,说明在HBV感染过程中,当患者HLA DR-13阳性时,HBcAg-特异性CD4+ Th1细胞,分泌IFN-γ, TNF-α等细胞因子,抑制HBcAg特异性IgM和anti-HBc-IgG的产生,并可能抑制或溶解HBcAg特异性B细胞,以此来调节机体免疫,在控制HBV感染和机体恢复中起重要作用。
    同时,研究者还发现,HBcAg是一个强免疫原性的亚病毒颗粒,在小鼠体内的研究显示,在非T细胞依赖状态下,HBcAg可以结合并活化B细胞。通过将HBcAg注入hu-PBL-NOD/SCID小鼠脾内,证实HBcAg可通过非T细胞依赖途径激活B细胞,与抵抗HBV胞膜抗原和T细胞严格依赖的HBeAg抗体的产生相反,对HBcAg的抗体应答被证明是不依赖T细胞的。这种特性是因为HBcAg的结构,个体HBcAg亚基的聚体上升形成棘突分布于细胞衣壳的表面并向外突出。优势B细胞表位定位于其顶端的这些棘突,对B细胞膜受体的交联可能是最理想的,可以解释HBV核心分子的异常活化能力。这种特性同样可以解释临床上的证据,事实上,不管他们的临床状况如何,所有感染过HBV的患者都产生抗HBc抗体, 并且他们的水平在慢性HBV感染期间特别高, 就像用HBcAg持续刺激B细胞的可能结果。
    利用SCID小鼠模型, 人们可以从细胞和分子水平研究HBV感染的过程及免疫干预的方法。免疫缺陷小鼠的不断发展将为我们提供更佳的各种移植免疫模型,从而直接促进对HBV感染研究的深入开展,使我们获得更多的成果,更好地造福人类。

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