注射用更昔洛韦、更昔洛韦氯化钠注射液、更昔洛韦葡萄糖注射液稳定性比较

[摘要] 目的 比较3种更昔洛韦注射液(注射用更昔洛韦、更昔洛韦氯化钠注射液、更昔洛韦葡萄糖注射液)的稳定性。方法对3种更昔洛韦注射液各两批进行影响因素试验、加速试验和12个月稳定性考察。在各种条件下的稳定性考察指标包括外观、澄明度、pH值、5一羟甲基康醛(5-HMF)、有关物质、含量、重金属、不溶性微粒、无菌和细菌内毒素检查。结果注射用更昔洛韦、更昔洛韦氯化钠注射液在各种考察条件下各项指标均无明显变化,更昔洛韦葡萄糖注射液对热不稳定,溶液色泽变黄,5-HMF和有关物质升高。结论更昔洛韦葡萄糖注射液不稳定,有效期应控制在1a以内。

    更昔洛韦(ganciclovir)是直接作用于病毒的全身用抗病毒药物之一,可抑制疱疹病毒的复制。更昔洛韦是一种2'一脱氧鸟嘌呤核苷酸的类似物,与阿昔洛韦不同之处在于其侧链上另有一个羟甲基。更昔洛韦具有广谱抗疱疹病毒的活性,是第一个治疗人体巨细胞病毒(CMV)感染的有效抗病毒药物。其作用机制是首先被编码UL97基因(CMV)的蛋白激酶同系物磷酸化成单磷酸盐,再通过细胞激酶进一步磷酸化成二磷酸盐和三磷酸盐。在CMV感染的细胞内,三磷酸盐的水平比非感染细胞中的水平高100倍,提示该药在感染细胞中可优先磷酸化。更昔洛韦一旦形成三磷酸盐,能在CMV感染的细胞内持续数天[1]。制品的稳定性对其临床应用效果起着至关重要的作用。笔者通过对3种更昔洛韦注射液在各种考察条件下各项指标的变化,来考察、比较3种更昔洛韦注射液的稳定性。

1 仪器与试药1.1 仪器  岛津LC一10A HPLC仪,检测器:SPD一10A紫外检测器,千谱色谱工作站。
1.2 试药  注射用更昔洛韦2批(批号:20051023,20051204)；更昔洛韦氯化钠注射液2批(批号:20051118,20060225)；更昔洛韦葡萄糖注射液2批(批号:20060117,20060320)。

2 方法与结果
2.1 考察条件 分别于第5,10天取样。取6个批号的更昔洛韦注射液(批号:20051023,20051204 ,20051118,20060225,20060117,20060320)分别于照度为4500lx的光源下,4,60和(25±2)℃温度条件下放置,分别于第5,10天和第3,6,12个月取样进行检测,并与考察前的结果比较。

2.2 3种更昔洛韦注射液质量标准的制定2.2.1 外观性状应为无色澄明液体或白色冻干粉末。

2.2.2 pH值 在25℃条件下用酸度计测pH值,注射用更昔洛韦pH值范围应为l0.5～11.5；更昔洛韦氯化钠注射液pH值范围应为7.0～8.0；更昔洛韦葡萄糖注射液pH值范围应为3.5～6.0。

2.2.3 有关物质 采用高效液相色谱法测定其有关物质及降解产物。

2.2.3.1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇一水一磷酸(3:97:0.01)为流动相；检测波长252nm。理论板数按更昔洛韦峰计算应不低于3000,鸟嘌呤峰与更昔洛韦峰的分离度应符合规定。

2.2.3.2 测定法 取本品作为供试品溶液,精密量取3mL,置于100mL容量瓶,加流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液。量取对照溶液20μL注入液相色谱仪,调节检测灵敏度,使主成分色谱峰的峰高为满量程的15％ ～20％ ；再量取供试品溶液与对照溶液各20μL,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍,供试品溶液的色谱图中如有杂质峰,量取除5一羟甲基糠醛(5-HMF)峰以外的各杂质峰面积的和,不得大于对照溶液的峰面积(3.0％)。

2.2.4  5-HMF的检查 照高效液相色谱法(《中华人民共和国药典)2000年版二部附录V D)测定。

2.2.4.1 色谱条件与系统适用性 实验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇一水一磷酸(3:97:0.01)为流动相,检测波长为284nm。

2.2.4.2 测定法 取本品作为供试品溶液,精密称取5-HMF对照品,用流动相溶解并定量稀释制成每1mL含12μg的溶液,作为对照品溶液。量取对照品溶液20μL注入液相色谱仪,调检测灵敏度,使主成分色谱峰的峰高为满量程的15％～20％；再量取供试品溶液与对照品溶液各20μL,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍,供试品溶液的色谱图中如有5-HMF峰,量取其峰面积,不得大于5-HMF对照品溶液的峰面积。

2.2.5 细菌内毒素 取本品,依法检查(《中华人民共和国药典})2005年版二部附录Ⅺ E),每1 mL中含细菌内毒素的量应小于0.5EU。取本品,依法检查(《中华人民共和国药典)2005年版附录ⅪE)。

2.2.6 无菌 取本品适量,用薄膜过滤法处理后,按无菌检查法(《中华人民共和国药典》2005年版二部附录ⅪH),依法检查,应符合规定。

2.2.7 可见异物 应符合《中华人民共和国药典>>2005年版二部有关规定。

2.2.8 含量测定照有关物质项下色谱条件测定更昔洛韦的含量。测定法:精密量取本品适量,用流动相定量稀释制成每1 mL含更昔洛韦40μg的溶液,作为供试品溶液；另精密称取在105℃干燥至恒重的更昔洛韦对照品约25mg,精密称定,置于25mL容量瓶中,加0.4％氢氧化钠溶液1mL使溶解,加流动相稀释至刻度,摇匀,精密量取适量,加流动相制成每1mL中含更昔洛韦40μg的溶液,作为对照品溶液。取供试品溶液和对照品溶液各20μL,分别注入液相色谱仪,记录色谱图；按外标法以峰面积计算,即得。

3 结果
    6批样品的pH值、可见异物、细菌内毒素、无菌检查项在各种考察条件下,放置前、后均符合相关规定。6批样品在照度为4 500 lx光照5,10d,各项指标与放置前比较,均无明显变化；4℃C放置5,10 d,样品无结晶析出,澄明度良好,各项指标与放置前比较,均无明显变化。3批更昔洛韦葡萄糖注射液的外观在(25±2)℃温度条件下放置过程中色泽逐渐加深变黄,但澄明度符合规定；在60℃温度条件下放置过程中色泽加深变黄,澄明度不符合规定。6批样品放置前后的有关物质、含量变化、5-HMF结果见表1—3。




3 讨论
    更昔洛韦在碱性条件下较易溶解,稳定性好。从本实验结果也可以看出,注射用更昔洛韦的pH值范围为10.5～11.5,在高温条件及长期放置中各项指标均很稳定；更昔洛韦氯化钠注射液pH值范围为7.0～8.0,在高温条件及长期放置中各项指标较稳定,有关物质有所上升,含量略有下降；更昔洛韦葡萄糖注射液pH值范围为3.5～6.0,在高温条件及长期放置中外观色泽、有关物质、含量及5-HMF变化较大,有的项目指标超过质量标准规定的范围。为提高更昔洛韦葡萄糖注射液的稳定性,建议将更昔洛韦葡萄糖注射液的储存条件定为低温。总之,更昔洛韦和葡萄糖配伍不稳定,为增加临床应用的安全性,建议在临床上首选注射用更昔洛韦,其次为方便护士配药可选用更昔洛韦氯化钠注射液,在一些心力衰竭、高血压患者不能过多增加电解质时,才考虑使用更昔洛韦葡萄糖注射液,最好用注射用更昔洛韦现配葡萄糖输液[1-5]。

[参考文献]
[1] 李春元,陈本川.更昔洛韦的临床应用发展[J].国外医药合成药生化药制剂分册,1998,19(3):172—175.
[2] 潘浩,欧阳山丹,庄丽盆.注射用更昔洛韦与6种注射液的配伍稳定性[J].海峡药学,2007,19(6):34—36.
[3] 施震,尹银嘉,李华.注射用更昔洛韦细菌内毒素检测[J] 中国海洋药物,2003,22(3):102—104.
[4] 陈华土,林志绣 HPLC测定注射用更昔洛韦含量[J].广东药学,2005,15(1):89—9O.
[5] 黄励,刘清红.复方更昔洛韦氯化钠注射液的制备和质量控制[J].医药导报,2006,25(8):34—36.

摘自《医药导报2008年2月第27卷第2期》

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