TA的每日心情 | 2018-7-26 15:32 |
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近年来,研究发现在绝大多数癌症中端粒酶活性与恶性肿瘤之间存在着较大的关联,因而对端粒酶的酶活性检测可为癌症的诊断、预测以及临床治疗提供重要依据。酶活性测定法是利用酶能专一而高效地催化化学反应的性质,通过测定酶促反应速度来检知体液等生物样品中某种酶的含量和活性的分析技术,美迪西提供酶活性检测服务。
发展细胞内各种酶的高灵敏检测新方法,在疾病的早期诊断等方面具有重要的科学研究意义。端粒,是细胞染色体末端的一种特殊结构,其作用是保持染色体的完整性。细胞每分裂一次,染色体的端粒就缩短一次,当端粒不能再缩短时,细胞就无法继续分裂,达到分裂极限并开始死亡。因此,端粒被科学家们视为“生命时钟”。 端粒酶是一种细胞中负责端粒的延长的酶,它可以把DNA复制的缺陷填补起来,藉由把端粒修复延长,可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗,使得细胞分裂的次数增加。
科学家们认为,端粒的缩短和很多疾病的发病直接相关。而且有许多研究表明,基因突变、肿瘤形成时,人体的端粒可表现出缺失、融合或序列缩短等现象;在一些癌细胞中,端粒酶的活性会增加,其与端粒之间有着某种联系,因此这些癌细胞可以分裂很多次。在某些特定的癌细胞中,如果阻断端粒酶的功能的话,端粒就会变短,癌细胞就会死亡,所以深入研究端粒和端粒酶的变化,是目前肿瘤研究的一个新领域。
端粒酶 酶活性检测服务
在正常的人体细胞中,端粒程序性的缩短,限制了细胞的生长能力,端粒酶的重新表达在细胞的永生化及癌变过程中起着重要作用。因此,有人认为,端粒酶活性正常表达的细胞更易癌变。在测定端粒酶活性时发现,90%以上的正常组织细胞的端粒酶呈阴性,从而将这个酶与细胞的永生化和肿瘤联系到一起。由于此种情况,对端粒酶活化、诊断和抑制具有重要的临床价值。
端粒酶酶活性检测基本原理
端粒酶在体外可以以其自身rna的模板区为模板,在适宜的寡核苷酸链的末端添加6个碱基的重复序列,用聚丙烯酰胺(page)凝胶电泳可显示6个碱基差异的梯带。1994年kim建立了基于pcr基础上的端粒重复序列扩增法,首先合成一个18nt的ts做上游引物,端粒酶结合ts末端的gtt并合成agggttag,然后每经过一次转位合成一个ggttag的6碱基重复序列,端粒酶灭活后,加入一个24nt的cx做下游引物,经过多次变性-退火-延伸,扩增端粒酶延伸产物。
端粒酶可以作为一种肿瘤标志物,发展快速、高灵敏的端粒酶活性检测新方法,开展酶活性检测服务对癌症的早期诊断和治疗具有重要的研究价值。
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