2014年执业药师《药物分析》章节复习精选 第五章

第五章 分光光度法
　　第一节 紫外—可见分光光度法
　　一、基本原理
　　紫外—可见吸收光谱属分子吸收光谱，是由分子的外层价电子跃迁产生的。
　　Lambert-Beer定律 A=ECL
　　A为吸收度，E为吸收系数，C为被测物质溶液浓度，L为光路长度。吸收系数E是物质的物理常数，随浓度C单位的不同有不同表示方法。
　　药品检验中使用百分吸收系数 ，物理意义是当吸光物质溶液浓度为1%(1g/100 ml)，液层厚度为1cm时的吸收度。
　　二、可见-紫外分光光度计
　　光源-单色器-吸收池-检测器-数据记录和处理
　　1.光源：紫外区采用氢灯或氘灯，可见光区采用钨灯
　　2.单色器：狭缝宽度大，单色光纯度差;宽度过小，检测灵敏度降低
　　3.吸收池：玻璃池适用于370nm以上的可见光区，石英池适用于紫外、可见光区，通常仅在紫外光区使用
　　三、吸收度的测定方法
　　1.对溶剂的要求：能充分溶解样品，与样品无相互作用，挥发性小，在测定波长处的吸收应符合要求
　　2.空白对照实验：将溶剂装入参比池，调节吸收度为0，去除溶剂和容器吸收、光散射、反射的影响。
　　3.测定波长确证
　　4.供试品溶液浓度：使吸收度在0.3～0.7范围内。
　　5.狭缝宽度：以减少狭缝宽度时，供试品溶液吸收度不再增加为准。
　　四、应用
　　1.鉴别
　　(1) 对比吸收光谱特征参数：核对供试品溶液λmax、 、A是否符合规定。可同时用几个峰位作为鉴别依据
　　(2) 比较吸收度比值一致性：吸收峰较多时，规定几个波长处吸收度比值作为鉴定标准
　　(3) 对比吸收光谱一致性
　　2.杂质检查
　　药物在紫外-可见光区有明显吸收，而杂质吸收弱;或杂质有明显吸收而药物无吸收，可通过控制吸收度限度来控制杂质量。
　　3.含量测定
　　(1) 对照品比较法：供试品溶液和对照品溶液浓度及测定条件应尽可能一致
　　(2) 吸收系数法：需对仪器进行严格校正和检定
　　(3) 计算分光光度法：通过数学处理消除样品中干扰组分的干扰
　　(4) 比色法：供试品与对照品同时操作
　第二节 荧光分析法
　　一、基本原理
　　荧光的产生：此化学物质能从外界吸收并储存能量(如光能、化学能等)而进入激发态，当其从激发态再回复到基态时，过剩的能量可以电磁辐射的形式放射(即发光)。荧光发射的特点是：可产生荧光的分子或原子在接受能量后即刻引起发光;而一旦停止供能，发光(荧光)现象也随之在瞬间内消失。
　　发射荧光的光量子数亦即荧光强度，除受激发光强度影响外，也与激发光的波长有关。各个荧光分子有其特定的吸收光谱和发射光谱(荧光光谱)，即在某一特定波长处有最大吸收峰和最大发射峰。选择激发光波长量接近于荧光分子的最大吸收峰
　　物质的激发光谱和荧光发射光谱，可以用作该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系，可以用作定量分析。荧光分析法的灵敏度一般较紫外分光光度法或比色法为高，浓度太大的溶液会有“自熄灭”作用，故荧光分析法应在低浓度溶液中进行。
　　二、荧光分光光度计
　　激发光源→激发光单色器→样品池
　　↓
　　发射光单色器→检测器→数据记录处理
　　样品池用低荧光材料制成，四面透光，发射光方向与激发光成直角。
　　三、应用
　　荧光分析可用于鉴别和含量测定。一般采用对照品比较法测定含量，灵敏度高、选择性好，但干扰多、线性范围窄，多用于需要高灵敏度和允许较大变异性的样品分析。
　　第三节 红外分光光度法
　　一、基本原理
　　红外光谱是由分子的振动、转动能极引起的光谱。当用一定频率的红外光照射某物质分子时，若该物质的分子中某基团的振动频率与它相同，则此物质就能吸收这种红外光，使分子由振动基态跃迁到激发态。
　　因此，若用不同频率的红外光依次通过测定分子时，就会出现不同强弱的吸收现象。用T%-λ作图就得到其红外光吸收光谱。红外光谱具有很高的特征性，每种化合物都具有特征的红外光谱。用它可进行物质的结构分析和定量测定。
　　二、红外光谱仪
　　光源-吸收池-单色器-检测器-数据记录和处理
　　三、红外光谱与物质结构的关系
　　一般将振动形式分成两类：伸缩振动和变形振动。
　　(1)伸缩振动
　　表示。n　　原子沿键轴方向伸缩，键长发生变化而键角不变的振动称为伸缩振动，用符号ν
　　(2)变形振动(又称弯曲振动或变角振动)
　　基团键角发生周期变化而键长不变的振动称为变形振动，面内变形振动又分为剪式(以δ表示)和平面摇摆振动。
　　红外光谱区可分成4000 cm-1 ~1300cm-1和1300 cm-1 ~ 400 cm-1两个区域。最有分析价值的基团频率在4000 cm-1 ~ 1300 cm-1 之间，这一区域称为基团频率区、官能团区或特征区。区内的峰是由伸缩振动产生的吸收带，比较稀疏，容易辨认，常用于鉴定官能团。
　　四、应用
　　1鉴别：红外光谱特征性强，鉴别时按《药品红外光谱集》中收载的制备方法制备，与该品种对照图谱比较应一致。
　　2.检查：依据药物与其同质异晶杂质在特定波数的吸收有显著差异，对无效或低效晶型进行检查
　　【A型题】
　　1溶液的厚度不变时，吸收系数的大小取决于
　　A光的波长 B溶液浓度
　　C光线强弱 D溶液颜色
　　E仪器性能
　　参考答案B
　　2紫外分光光度法测定药物含量时，应采用
　　A石英管 B石英吸收池
　　C玻璃比色皿 D玻璃吸收池
　　E样品室
　　参考答案B
　　3紫外-可见吸收光谱属于
　　A电子跃迁光谱 B分子振动光谱
　　C发射光谱 D荧光光谱
　　E原子吸收光谱
　　参考答案A
　　4在测定吸收度时，为消除溶剂及其他因素的影响，一般需用
　　A空白校正 B溶剂校正
　　C仪器校正 D波长校正
　　E对照实验
　　参考答案A
　　5采用紫外-可见分光光度法测定药物含量时，配制待测溶液浓度应使
　　A测得吸收度尽量大
　　B吸收度大于0.1
　　C吸收度大于0.7
　　D吸收度在0.1～0.8
　　E吸收度在0.3～0.7
　　参考答案E
　　6红外吸收光谱又称
　　A吸收光谱 B电子跃迁光谱
　　C分子振动光谱 D分子转动光谱
　　E分子振动-转动光谱
　　参考答案E
　　7被分离组分在固定相与流动相之间分配达到平衡时浓度比称为
　　A浓度比 B质量比
　　C分配系数 D容量因子
　　E质量分配系数
　　参考答案C
　　8TLC的最佳Rf值范围是
　　A0.1～0.9 B0.2～0.8
　　C0.3～0.5 D0.4～0.6
　　E0.3～0.7
　　参考答案C
　　9 HPLC最常用的检测器是
　　A热导检测器
　　B电子捕获检测器
　　C氢火焰离子化检测器
　　D荧光检测器
　　E紫外检测器
　　参考答案E
　　【B型题】
　　A3300～3000cm-1
　　B1300～1000cm-1
　　C1900～1650cm-1
　　D1000～650cm-1
　　E3750～3000cm-1
　　1νOH或νNH
　　2ν≡H
　　3νC-O
　　4νC=O
　　参考答案1E 2A 3B 4C
　　A峰高 B峰面积
　　C峰宽 D调整保留时间
　　E峰位
　　5用于定量测定的色谱参数
　　6用于衡量柱效的参数
　　7用于鉴别药物的色谱参数
　　8被分离组分在固定相中停留时间
　　参考答案5B 6C 7E 8D
　　【X型题】
　　1用于药物含量测定的紫外分光光度法
　　A吸收系数法 B计算分光光度法
　　C对照品比较法 D自身对照法
　　E灵敏度法
　　参考答案ABC
　　2TLC中影响Rf值的主要因素有
　　A被分离物质特性 B薄层板性质
　　C展开剂性质 D展开时间
　　E展开室内展开剂的饱和度
　　参考答案ABCE
　　3中国药典规定正文项下色谱条件不得任意改变者有
　　A检测器种类 B固定液品种
　　C特殊指定的色谱材料
　　D进样量 E载气
　　参考答案ABC
　　5内标法中内标物应具备的条件
　　A保留时间与待测物相近
　　B与待测物分离度大于1.5
　　C符合要求的纯物质
　　D待测样品中不含有的组分
　　E待测样品与内标的相应信号比值应和待测样品浓度成正比
　　参考答案ABCDE

谢谢